Diagnóstico Laboratorial das KPC - Parte II "O TESTE DE HODGE MODIFICADO"

Como já foi dito anteriormente, a detecção laboratorial de uma bactéria portadora do gene KPC é difícil, fazendo necessária a utilização de algumas técnicas moleculares, para a identificação deste gene.

Mas hoje vamos falar de um teste bastante utilizado nos laboratórios de microbiologia: O TESTE DE HODGE MODIFICADO (THM)

O Teste de Hodge é utilizado nos laboratórios clínicos ( e quando são) para verificar a presença de carbapenemases. O teste é simples, numa placa contendo o meio de cultura ágar muller hinton, semeia-se uma cepa sencível ( ATCC 25922), que se trata de uma Escherichia coli sensível a todas as drogas. O semeio deve ser realizado com auxílio de um swab, espalhando a suspensão bacteriana por toda a extensão do meio de cultura, a fim de forma-se um tapete.

Semeio em placa de petri - Observa-se que toda a placa deve ser tomada pela suspensão bacteriana.

 Após a placa seca, adiciona-se ao centro do meio de cultura um disco de antimicrobiano carbapenêmico ( meropenem ou ertapenem) e faz-se estrias do isolado que se quer testar do centro da placa até sua periferia.

O teste de hodge positivo se confirmará, quando houver uma distorção no halo de inibição da cepa ATCC como mostrado na figura acima. Isso confirmará que a cepa é produtora de uma carbapenemase. Mas é importante ressaltar que esse teste apenas foi validado para testar isolados de Klebsiella pneumoniae produtoras de carbapenemases, ou seja, em outras espécies bacterianas o MIC (Concentração Mínima Inibitória) deve ser realizado.

Diagnóstico Laboratorial das KPC - PARTE I

Hoje com certeza se chegarmos em um laboratório clínico, muitos bacteriologistas olharão para diversos isolados bacterianos e estufarão o peito pra dizer: ENCONTREI UMA KPC...

E aí, será que ele está certo? E os 50 anos dele na profissão, nessa hora conta?

A detecção de isolados produtores de KPC num laboratório da bacteriologia é bastante duvidosa e gera muitas polêmicas.

Como já havia falado em postagens mais antigas, o gene KPC é responsável pela síntese das carbapenemases, estas enzimas tem a capacidade de hidrolisar diversos fármacos antimicrobianos ( com destaque os beta-lactâmicos - Penicilinas, cefalosporinas de 1^a a 3^a geração e os carbapenêmicos), porém são inibidas pela presença de inibidores de beta lactamases (como o Ácido clavulâncico).

Então no laboratório de Microbiologia, o primeiro possível sinal de uma bactéria KPC + , é a leitura do antibiograma. Quando lemos um antimbiograma e observamos que o micro-organismo que foi semeado em placa é resistente aos carbapenêmiocos ( Ertapenem, Imipenem e Meropenem) e as cefalosporina de 3^a geração (Cefotaxima, ceftriaxona, ceftazidima, ceftizoxime), apresentando o Teste de ESBL positivo, podemos SUSPEITAR de KPC.

Antibiograma

É galera, podemos apenas suspeitar e não afirmar. Quem nos garante que essa resistência demonstrada pelo micro-organismo não seja devido a outro mecanismo de resistência (Bomba de Efluxo, alteração da permeabilidade da membrana, entre outros).

Diversos mecanismos de resistência numa bactéria.

Além destes argumentos, vale argumentar que os carbapenêmicos, principalmente o Imipenem, apresenta falsa sensibilidade in vitro, ou seja a bactéria é resistente aos carbapenêmicos, mas no antibiograma se demonstra sensível. Isso dificulta ainda mais na identificação dos isolados KPC +

Na próxima postagem, vamos discutir sobre o Teste de Hodge Modificado, e como ele pode identificar isolados KPC +.

Por: Willames "Burkholderia"